Integrantes:
Flores Hernandez Cynthia Giselle
López Soto Martha
Ramírez Barragán Brenda Berenice
Huerta Álvarez Tania Sarai
Esparza Quiroz Brenda Lucila
Mercado Carrizales Delia Antonia
Ventura Ventura Carolina
Grupo: 2L2M
Mesa: 3
Índice
Introducción
Objetivo
Primera Parte
Segunda Parte
Tercera Parte
Cuarta Parte
Conclusión
Introducción
Este es nuestro último examen en la materia de operar equipo y material del laboratorio lo único como que puedo decir y lo único que puedo decir como encargada de la esa que en todo nuestro trabajo como equipo que a pesar de todos nuestros errores hemos aprendió mucho de ellos ya que hay u dicho de que con los errores se aprende y espero que aprendamos mucho en adelante.
Objetivo
Nuestro objetivo fue de pasar el examen y echarle ganas a todas las prácticas pero lo que nos falto fue de no tener comunicación y esperar que solo una persona haga el trabajo completo todo lo que anduve observando cómo encargada del equipo es que no le echan ganas no se ponen las pilas en pocas palabras y eso causa los errores ya que no solo una o dos personas pueden con todo y eso causa que el maestro nos regañe como equipo pero a pesar de eso en algunas ocasiones nos ponemos a trabajar como equipo y en esos momentos me siento apoyada.
Primera Parte
1 medio de cultivo
El medio de cultivo que elaboramos fue Dextrosa Saboraud de 65gr. Luego iniciamos con la regla de 3 que fue
65gr x 60ml = 3900
3900 % 1000ml = 3.9 ml
3.9ml + 17.7gr del vidrio de reloj = 21.6 .gr
Ya obtenida los resultados empezamos a preparar el medio el medio de cultivo ya terminado la cantidad de gramos que le debíamos de poner en el matraz con agua destilada empezamos a revolver que n quede gránulos del medio de cultivo, luego lo pusimos en el fuego del mechero y le di vueltas como manecillas de reloj lo revolvemos con un agitador para que no quede coágulos en el matraz. Luego lo Cubrimos con algodón y con tape lo colocamos en el autoclave y dura hay 20 minutos Luego dejando enfriar el medio de cultivo esterilizamos el vaso precipitado solo la boquilla luego pedimos 3 cajas petric indicando que ya que se enfriara el medio de cultivo lo teníamos que colocar hay pero estando cerca de los mecheros para eterizando para que no se contaminen dejamos enfriar el medio de cultivo hasta que lo pudiéramos tocar con la mano ya enfriado el medio de cultivo colocamos cierta cantidad de lo que nos salió de la regla de 3 en las cajas petric destilando la boquilla del matraz ya teniendo el medio de cultivo en las 3 cajas pretic dejamos que se según o que se ge latine bien hasta que lo podamos cerrar y etiquetar con ciertos datos.
2 Aglutinación En Sangre
En la prueba de aglutinación en sangre yo flores Hernández Cynthia Giselle saque una muestra de sangre a la compañera López soto Martha l principio me puse nerviosa porque era mi primera vez pero me salió bien ya que no le revente l3ml en el tubo de ensayo vena ni le deje moretón pero la invite a comer . Realizando la técnica de veno punzón le saque 5ml de sangre que lo dividimos en 3ml en el tubo de ensayo con tapón color rojo y los 2 ml que sobraron los coloque en el tubo de ensayo con tapón color morado con esa sangre pipeteamos con la pipeta Pasteur y colocamos 3 gotas en la placa de porcelana es acabada ya teniendo las 3 gotas se le aplica colorante revolviendo con los palillos de madera nos sale que tipo de sangre es el paciente y nos salió que es o+ en esta práctica aplicamos las fases pre analítica que es el ingreso del paciente y toma de muestra y la post analítica validación y entrega de resultados.
3 Aglutinación En Suero
Como en la prueba de aglutinación en suero es de centrifugar la sangre que habíamos sacado y colocado 3 ml de sangre en el tubo de ensayo de tapón color rojo lo colocamos en la centrifuga durante 5 minutos separamos el suero colocándolo en otro tubo de ensayo pipeteamos el suero con la pipeta pasteur colocando 6 gotas en la lamina de cristal poniendo el suero en los circulos color rojo poniéndole colorante en cada gota revolviéndolo con palillos de madera ya viendo bien lo observamos en el microscopio óptico observándolo que solo 3 se aglutinaron ya viendo bien los resultados se los entregaron al paciente López soto Martha. En esta practica aplicamos las 3 fases la primera analítica toma de muestra al paciente la segunda fase es analítica preparación de muestra y procedimiento y la tercera es post analítica entrega de resultados
Segunda Parte
1 Siembras
nuestras siembras se trataba de muestra del pie que debíamos poner en el medio de cultivo dextrosa saboraud pero como no estudiamos y no escuchamos las opiniones de los demás nos salió algo mal ya que las muestras que hicimos fue de orina, agua de horchata y muestra de saliva las siembras que utilizamos fueron las siguientes por dispersión, separamiento y de medio la primera que elaboramos fue de orina la siembra dispersión quien lo elaboro fue mi compañera Ramírez Barragán Brenda Berenice el procedimiento fue que agarro la barrilla de cristal la paso por el fuego, después con el agua destilada esterilizo, luego coloco una pequeña cantidad de orina y en el medio se realizo la siembra por dispersión.
Luego mi compañera Esparza Quiroz Brenda Lucila la muestra que utilizo fue agua de horchata el procedimiento fue el siguiente utilizo y paso el asa bacteriológica por el mechero de bucee hasta que se puso al rojo vivo, abrió el medio de cultivo en un lugar esterilizado agarro unas gotas de la muestra del agua de horchata realizando la siembra de separamiento.
Por ultimo mi compañera Huerta Álvarez Tania Saray realizo la siembra con la muestra utilizando la saliva de mi otra compañera López Soto Martha el procedimiento de la elaboración fue que primero abrió un hisopo nuevo y se lo dio a la paciente diciéndole que frote bien sus encimas, lengua y dientes durante 1 minuto ya teniendo la muestra la coloco en el medio de cultivo realizando la siembra de medio o mas conocida como saboraud ya teniendo loas tres cajas petric las cerramos y las etiquetamos con sus datos.
cuarta parte
observacion macroscopica del crecimiento de las siembras
actualmente hasta ahora el gran crecimiento de las siembras ha aumentado de bacterias los ultimos 3 dias ya que con las muestras presisas hay bacterias y hongos en la primera siembra lo elaboro fue mi compañera Ramírez Barragán Brenda Berenice el procedimiento fue que agarro la barrilla de cristal la paso por el fuego, después con el agua destilada esterilizo, luego coloco una pequeña cantidad de orina y en el medio se realizo la siembra por dispersión el crecimiento de la bacteria ha aumentado demaciado ya que se puede ver que el crecimiento se expandio por completamente en el medio de cultivo.
Luego mi compañera Esparza Quiroz Brenda Lucila la muestra que utilizo fue agua de horchata el procedimiento fue el siguiente utilizo y paso el asa bacteriológica por el mechero de bucee hasta que se puso al rojo vivo, abrió el medio de cultivo en un lugar esterilizado agarro unas gotas de la muestra del agua de horchata realizando la siembra de separamiento el crecimiento es totalmente pequeño ya que no se expandio como en el primero hay una pequeña cantidad de bacterias en el medio de cultivo.
Por ultimo mi compañera Huerta Álvarez Tania Saray realizo la siembra con la muestra utilizando la saliva de mi otra compañera López Soto Martha el procedimiento de la elaboración fue que primero abrió un hisopo nuevo y se lo dio a la paciente diciéndole que frote bien sus encimas, lengua y dientes durante 1 minuto ya teniendo la muestra la coloco en el medio de cultivo realizando la siembra de medio o mas conocida como saboraud ya teniendo loas tres cajas petric las cerramos y las etiquetamos con sus datos en este no hay mucho crecimiento ya que solo se puede identificac una minima aumentacion de bacterias en el medio de clutivo.
Quinta parte
Frotis
Elaboracion del frotis
1.Con el asa bacteriológica se va a realizar un frotis en un porta objetos de cristal
2.Se toma el asa bacteriológica y se pone en la flama del mechero dejándola al rojo vivo para que se esterilice se retira del fuego, se toma una pequeña gota de agua destilada, con ella misma se extrae una pequeña muestra del material bacteriológico que creció en las cajas petri.
3.Una vez teniendo este material en el asa se acude a depositarlo en el porta objetos en su parte central, en su parte central desplazando de izquierda a derecha el material bacteriológico hasta que nos quede una película delgada, una vez teniéndolo verificamos con el instructor si ya está lista para poder fijarla al color.
4.ya realizando el frotis se fija de forma directa en sus partes laterales a lo largo para su transporte, se toma el porta objetos de forma lateral para poder pasar por encima de la flama (nunca se debe dejar en forma directa) en la flama. Una vez fijado el frotis, queda listo para el proceso de tinción.
Sexta parte
Tinción de gram y observación macroscópica con aceite de palo o de inversión y con objetivo de 100 x
1.Frotis realizado y fijado en porta objetos, el cual debe pasar que el proceso de tinción utilizando la técnica de forma correcta ya anteriormente investigada. Esta técnica se basa en 9 pasos donde se aplica los tiempos necesarios.
2.El frotis debe pasarse en el proceso de tinción sin pasar de los tiempos indicados ya que se pude quemar el producto realizado lo que ocasionaría volverlo a realizar desde el principio (debemos hacer bien las cosas ya que el tiempo es nuestro enemigo)
3.Si el frotis queda bien teñido, unas ves teñido el frotis se dejara listo para el siguiente proceso que es la observación macroscópica. (Cámara)
4.A la laminilla se le agrega una gota de inmersión
5.Se monta la laminilla al microscopio sobre la platina y que quede bien ajustadas con las pinzas de la platina.
6.Observamos en objetivo de 100x para poder clasificar las estructuras de los microorganismos encontrados que son esferas o rueditas, bolitas en 1, 2, 3,4 en cadena de 5 o 6 o agrupados en muchas bolitas (cocos) en bastones y se les da el nombre de bacilos. Una vez terminada la tinción en la laminilla de cristal se le aplica una gota de aceite de inmersión para poder observarlo
Ya hecha la técnica de frotis lo siguiente fue realizar la técnica de gram poniendo primero en solución violeta dejándolo puesto durante 1 minuto luego lo remojamos en lugol durante 1 minuto, luego lo enjuagamos con alcohol hasta que no se ve el lugol y la solución violeta ya terminándolo lo dejamos por 1 minuto en sheferanja algo así ya terminada lo lavamos con agua corriente dejando este que no toque el frotis realizado luego lo secamos con el aire ya secado lo que hacemos es realizar la siguiente practica de observación macroscópica poniéndole una gota de aceite de palo poniéndolo en el microscopio luego empezamos a enfocar con objetivo de 100x ya teniendo la imagen empecé a ver un tipo de bacteria que contenía gram positivas y gram negativas sus colores eras como rosas con círculos violetas
